制冷劑的選擇對于高低溫試驗箱的制冷系統起著關鍵性的作用，但是制冷劑的選擇又是一個比較復雜的技術經濟問題，需要考慮的因素很多，因為制冷劑屬于消耗品，一般高低溫試驗箱或高低溫濕熱試驗箱使用幾年后，制冷劑消耗完了，制冷效果達不到要求，所以選擇時應根據具體情況，進行全面的技術分析。找原制造進行灌裝。
1.高低溫試驗箱的制冷劑考慮必須選用符合國家環保法規的制冷劑。
2.高低溫試驗箱應考慮制冷劑性質，根據制冷劑的熱力性質、物理性質和化學性質，選用那些無毒、不爆炸、不燃燒的制冷劑；選用制冷劑應傳熱好、阻力小、與制冷系統用材料相容性好。所以對于有些由國家規定的行業，必須采用無毒、無污染、安全制冷效果好的制冷劑。
3.高低溫試驗箱制冷劑考慮壓縮機的類型，不同的制冷壓縮機的工作原理有所不同。體積式壓縮機是通過縮小制冷劑蒸氣的體積提高其壓力的，一般選用單位體積制冷量大的制冷劑，如R404a,R23等。制冷劑的種類很多，隨著科學技術的進步．新工質不斷出現，以適宜于不同的制冷裝置。
4.高低溫試驗箱制冷劑還得考慮制冷溫度的要求，根據制冷劑溫度和冷卻條件的不同，選用高溫(低壓)、中溫(中壓)、低溫(高壓)制冷劑。通常選擇的制冷劑的標準蒸發溫度要低于制冷溫度10℃。選擇制冷劑還應考慮制冷裝置的冷卻條件、使用環境等。運行中的冷凝壓力不應超過壓縮機安全使用條件的規定值。高低溫濕熱試驗箱可做零下60℃的溫度試驗，所以制冷劑的要求更高。和社會上的汽車空調制冷劑不同的是，汽車制冷劑只能用車外空氣做冷卻介質，對其產生影響的氣溫、風速、太陽輻射、熱輻射等因素無不在頻繁發生變化，其運行條件決定它只能選用高溫(低壓)制冷劑，過去選用R12，目前大多選用R404a。
